白介素-6受體（可溶性）ELISA KIT
白介素-6受體（可溶性）ELISA KIT，專為定量檢測生物樣本里可溶性白介素 - 6 受體含量設(shè)計，在科研領(lǐng)域?qū)γ庖呒把装Y研究意義重大。
檢測原理：基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法。酶聯(lián)板預(yù)先包被針對可溶性白介素 - 6 受體的特異性抗體。樣本加入后，其中的可溶性白介素 - 6 受體與固相抗體結(jié)合。隨后加入酶標記的抗可溶性白介素 - 6 受體抗體，形成 “固相抗體 - 可溶性白介素 - 6 受體 - 酶標抗體" 復(fù)合物。經(jīng)洗滌去除未結(jié)合物，加入底物溶液（如 TMB），在酶催化下底物顯色，顏色深淺與樣本中該受體含量成正比。通過酶標儀在 450nm 波長測吸光度，與標準曲線對比得出樣本中可溶性白介素 - 6 受體濃度。
試劑盒組成
酶聯(lián)板：有 96 孔或 48 孔規(guī)格，預(yù)包被抗體，為反應(yīng)承載物。
標準品：通常為凍干品，需用標準品稀釋液復(fù)溶并稀釋成系列濃度梯度，如 0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL，用于繪制標準曲線。
樣本xi釋液：用于稀釋濃度過高的待測樣本，使樣本濃度適配試劑盒檢測范圍。
酶標抗體：即 HRP 標記的抗可溶性白介素 - 6 受體抗體，為濃縮液，需用酶標抗體稀釋液按要求稀釋。
酶標抗體稀釋液：專門用于稀釋酶標抗體。
底物溶液：如 TMB 底物，與酶標抗體中的 HRP 反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化。
洗滌液：一般為濃縮液，按比例用蒸餾水或去離子水稀釋后，用于洗滌酶聯(lián)板，去除未結(jié)合物質(zhì)，降低背景干擾。
終止液：多為強酸溶液（如硫酸），用于終止底物顯色反應(yīng)，穩(wěn)定反應(yīng)液顏色以便讀數(shù)。
封板膜：溫育時覆蓋酶聯(lián)板，防止液體蒸發(fā)和外界污染。
使用說明書：詳細介紹使用方法、注意事項、性能指標等。
樣本要求
血清：采集血液后，室溫放置 2 小時或 4℃過夜，1000×g 離心 20 分鐘取上清，采血需用無熱原、無內(nèi)毒素一次性器材。
血漿：可用 EDTA、肝素等抗凝，樣本采集后 30 分鐘內(nèi)，2 - 8℃下 1000×g 離心 15 分鐘取上清。
細胞培養(yǎng)上清：1000×g 離心 20 分鐘，去除細胞碎片和雜質(zhì)后取上清檢測。
組織勻漿：用預(yù)冷 PBS（0.01M，pH = 7.4）沖洗組織，去除殘留血液，剪碎組織后按 1:9（w/v）加 PBS，冰上充分研磨，5000×g 離心 5 - 10 分鐘取上清。
樣本采集后若短期內(nèi)檢測，可 4℃保存；長期保存需 - 20℃或 - 80℃凍存，且避免反復(fù)凍融，溶血樣本一般不適合檢測。
操作流程
準備工作：從冰箱取出試劑盒，平衡至室溫（約 30 分鐘），稀釋濃縮洗滌液。
加樣：設(shè)空白孔、標準品孔和樣本孔。空白孔加樣本xi釋液，標準品孔加不同濃度標準品，樣本孔加處理好的樣本，每孔加樣量通常 100μL，輕輕混勻，37℃溫育 90 分鐘。
洗滌：棄去孔內(nèi)液體，用洗滌液加滿各孔，浸泡 1 - 2 分鐘后甩干，重復(fù)洗滌 5 次，確保洗凈未結(jié)合物質(zhì)。
加酶標抗體：每孔加 100μL 稀釋好的酶標抗體工作液，37℃溫育 60 分鐘。
再次洗滌：重復(fù)上述洗滌步驟。
顯色：每孔加 90μL 底物溶液，輕輕混勻，37℃避光顯色 15 - 30 分鐘（依實際顯色情況判斷）。
終止反應(yīng)：每孔加 50μL 終止液，溶液顏色由藍色變?yōu)辄S色。
讀數(shù)：加終止液后 15 分鐘內(nèi)，用酶標儀在 450nm 波長測各孔吸光度（OD 值）。
計算結(jié)果：以標準品濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標繪制標準曲線。根據(jù)樣本 OD 值從標準曲線查出對應(yīng)濃度，若樣本稀釋過，需乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)得實際濃度。
性能指標
檢測范圍：常見為 15.6 - 1000 pg/mL 等區(qū)間，滿足多種樣本檢測需求。
靈敏度：可低至 7.8 pg/mL 甚至更低，能檢測微量的可溶性白介素 - 6 受體。
特異性：對該受體高度特異，與其他細胞因子受體等幾乎無交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)一般小于 10%，板間變異系數(shù)小于 15%，保障檢測結(jié)果穩(wěn)定可靠。
產(chǎn)品型號：
更新時間：2025-07-04
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：2982
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